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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 20136-13
    免疫組化實(shí)驗(yàn)的小竅門

    1.固定:用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。BouinS固定液:飽和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強(qiáng),固定較好,結(jié)構(gòu)完整,但因偏酸,對抗原有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標(biāo)本的長期保存。PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存...

  • 20136-13
    酶聯(lián)方法的標(biāo)本收集與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

    臨床檢驗(yàn)常見的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。(一)臨床標(biāo)本的收集A、血液標(biāo)本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他...

  • 20136-13
    ELISA 方法的實(shí)驗(yàn)原理和操作過程.

    ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。(一)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除...

  • 20136-13
    動植物樣品的采集及DNA樣品的提取

    動物樣品的采集及處理方法遺傳學(xué)數(shù)據(jù)在野生動物和圈養(yǎng)動物的保護(hù)和管理中變得日益重要。在本文中,我們總結(jié)了一些能簡便而有效地獲得樣品及數(shù)據(jù)的方法。我們在采集樣品之前,對將要進(jìn)行的遺傳學(xué)分析有所了解。然而,采集者并非都是研究者,當(dāng)采集地與實(shí)驗(yàn)室有相當(dāng)距離時,采集者常常要保存好樣品直到有合適的接受者或存放地,這就要求采集者應(yīng)具備一定的經(jīng)驗(yàn)。首先,所有樣品均應(yīng)以個體序號進(jìn)行標(biāo)注,并且應(yīng)寫上種名、性別、采樣者姓名以及采集日期,越詳盡越好,以便同一個體的不同類數(shù)據(jù)可以相互引用,另外,地理來...

  • 20136-13
    實(shí)驗(yàn)室常用細(xì)胞目錄名詞大全

    3T3swissSwiss小鼠胚胎成纖維細(xì)胞A549人肺癌細(xì)胞(能產(chǎn)生Keratin)CHOdhfr二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞CHO-K1中國倉鼠卵巢細(xì)胞Cyc-tAg小鼠T淋巴細(xì)胞瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染)DU145人前列腺癌細(xì)胞FDC-P1小鼠正常骨髓細(xì)胞GH3大鼠垂體瘤細(xì)胞GT1.1人垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素)HEK-293人胚腎細(xì)胞Hela人宮頸癌細(xì)胞MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細(xì)胞MCF7人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435s...

  • 20136-13
    質(zhì)粒提取簡介及問題分析

    一、導(dǎo)論質(zhì)粒提取的原理:轉(zhuǎn)自復(fù)旦大學(xué)一位老師的帖子,后面是方法介紹堿裂解法從大腸桿菌制備質(zhì)粒,是從事分子生物學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)室每天都要用的常規(guī)技術(shù)。可是我收研究生十幾年了,幾乎毫無例外的是我那些給人感覺什么都知道的學(xué)生卻對堿法質(zhì)粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因?yàn)椤斗肿涌寺 防锩嬷恢v實(shí)驗(yàn)操作步驟,而沒有對原理進(jìn)行詳細(xì)的論述。這是導(dǎo)致我的學(xué)生誤入歧途的主要原因。后來我發(fā)現(xiàn)其實(shí)是整個中國的相關(guān)領(lǐng)域的研究生水平都差不多,甚至有很多“老師”也是這個狀態(tài)。這就不得不讓人感到悲哀了...

  • 20136-13
    常用熒光染料的激發(fā)和發(fā)射波長

    FluorescentDye(熒光染料)Excitation(激發(fā)波長,nm)Emission(發(fā)射波長,nm)Cy2489506GFP(RedShifted)488507YO-PRO-1491509YOYO-1491509Calcein494517FITC494518FluorX494519Alexa488490520Rhodamine110496520ABI,5-FAM494522OregonGreen?500503522OregonGreen?488496524Rlbo...

  • 20136-13
    DEAE-Sephadex A-50柱層析純化免疫球蛋白

    (一)原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)镺H-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白(等電點(diǎn)為PH6.85~7.5),其余均屬酸性蛋白。在PH7.2~7.4的環(huán)境中,酸性蛋白均被DEAE-SephadexA-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通過柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白則被吸附在柱上,從而便可分離獲得純化的IgG。DEAE-sephadexA-50柱層析是...

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