午夜精品久久久久久久,久久久无码中文字幕久...,国产精品丝袜黑色高跟鞋,一本色道久久88综合亚洲精品

新聞中心

News Center

當(dāng)前位置:首頁新聞中心BD BiocoatTM 細(xì)胞檢測相關(guān)系統(tǒng)

BD BiocoatTM 細(xì)胞檢測相關(guān)系統(tǒng)

更新時間:2017-09-08點(diǎn)擊次數(shù):857

Biocoat腫瘤侵襲系統(tǒng)

BD 產(chǎn)品貨號354166, 354165

儲存和運(yùn)輸:-20度儲存,干冰運(yùn)輸。

使用指南:

BD BiocoatTM 腫瘤侵襲系統(tǒng)由包被Matrigel基質(zhì)的特殊材質(zhì)BD FluoroBlok 熒光屏蔽8.0μm PET膜的培養(yǎng)小室組合而成。BD BiocoatTM 腫瘤侵襲系統(tǒng)具有以下特點(diǎn):提高腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的通量;自動化非破壞式的熒光檢測;節(jié)約抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物篩選的時間和勞動力;高度可重復(fù)性:平均z’=0.7(24);平均z’=0.66(96);使用簡便:無需反復(fù)取液和操作,僅需加入細(xì)胞、標(biāo)記物,然后直接讀板。

操作過程:

凍融

-20冰箱中取出產(chǎn)品,使其自然升溫到室溫。取出培養(yǎng)板在細(xì)胞小室內(nèi)加入到500μL 37預(yù)熱的PBS,37CO2環(huán)境下孵育2小時。解凍后,小心去除小室內(nèi)的培養(yǎng)基,避免破壞Matrigel基質(zhì)膜。

BD鈣黃綠素Calcein AM熒光染色劑后標(biāo)記法

細(xì)胞通過侵襲消化基質(zhì)膜后遷移到下小室,采用熒光標(biāo)記定量細(xì)胞。細(xì)胞的侵襲能力用終點(diǎn)計(jì)算法計(jì)算得到。對于采用實(shí)時動力曲線的計(jì)算,推薦使用前標(biāo)記法。

2.1 如步驟1準(zhǔn)備培養(yǎng)板。

2.2 胰酶消化細(xì)胞單層后制得細(xì)胞懸液,溶于無血清DMEM培養(yǎng)基,推薦濃度為5×104 cells/mL

2.3 上小室中加入500μL細(xì)胞懸液(2×104 cells)。

2.4 通過進(jìn)樣口在下小室中加入750μL誘導(dǎo)劑。

2.5 37,5%CO2 條件下孵育培養(yǎng)板和對照板20-22小時(由細(xì)胞類型決定)。

2.6 孵育后,小心去除上小室中的培養(yǎng)基。避免破壞Matrigel基質(zhì)膜。可以通過反扣住培養(yǎng)板,輕輕拍打,以使培養(yǎng)基的傾倒。

2.7 將培養(yǎng)小室轉(zhuǎn)移到另一塊24孔板中,該孔板含有0.5 mL每孔的4μg/mL 鈣黃綠素(溶于HBSS)。在37,5%CO2的環(huán)境下培養(yǎng)一小時。

3、DilC12(3)熒光染色劑預(yù)標(biāo)記法

細(xì)胞接種于孔板之前先用染色劑標(biāo)記,可用于均一化實(shí)驗(yàn),所產(chǎn)生的實(shí)時動力數(shù)據(jù)可揭示細(xì)胞通過基底膜侵襲的動力曲線,不需要分解和破壞各個時間點(diǎn)。

3.11.所示凍融。

3.2 10μg/mLDilC12(3)溶解于含10%FBSDMEM中,37 1小時標(biāo)記單層細(xì)胞。

3.3 胰酶消化細(xì)胞單層,制備細(xì)胞懸液,溶于無血清DMEM培養(yǎng)基,濃度為1×105 cells/mL。

3.4 上小室加入500μL細(xì)胞懸液(5×104cells)。

3.5通過進(jìn)樣口在下小室加入750μL誘導(dǎo)劑。

3.6 37,5%CO2環(huán)境下孵育培養(yǎng)板和對照板18-24小時(由細(xì)胞類型決定)。在549激發(fā)波長和565nm發(fā)射波長條件下進(jìn)行熒光讀數(shù)。

4、數(shù)據(jù)計(jì)算

侵襲率%=受趨化劑誘導(dǎo)通過Matrigel基質(zhì)膜的細(xì)胞平均相對熒光值/受趨化劑誘導(dǎo)通過未包被FluoroBlok熒光膜的細(xì)胞平均相對熒光值×100

注意:數(shù)據(jù)可以用相對熒光值RFU或侵襲百分比表示,后者在標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)處理中更有用。背景扣除,計(jì)算平均背景值,將其從各個孔板中扣除。

 

自動化操作注意事項(xiàng)

BD Falcon FluoroBlok 24孔板培養(yǎng)小室系統(tǒng)能適用于自動化操作系統(tǒng)。蓋子可以用標(biāo)準(zhǔn)機(jī)械手取走,也可用吸力取走。為了避免各孔間污染,孔板設(shè)定為一個統(tǒng)一的方向。為了與培養(yǎng)小室匹配,確保Falcon的商標(biāo)均在2者上方,面向同一個方向。任何規(guī)格的槍頭都能達(dá)到小室的兩邊。包括50μL100μL,200μL,250μL,1000μL。

白嫩人妻娇喘欲仙欲死| 久久久久久久97| 和朋友换娶妻a2020| 校草学长h肉高辣1v1| 国产精品无码一区二区三区在| 豪妇荡乳1一5全集| 久久中文字幕人妻熟av女蜜柚m| 亚洲欧洲日产国码无码久久99| 精品人妻一区二区三区四区| 午夜福利影院| 伦理片在线观看| 粉嫩虎白女P虎白女在线| 黑人巨大无码中文字幕无码| 女人被躁到高潮嗷嗷叫文| 鸡毛飞上天电视剧全集观看免费| 最近免费中文字幕大全高清10| 高清无码一区二区在线观看吞精| 麻豆精产国品一二三产区区| 男人撕开奶罩揉吮奶头gif| g0g0全球高清大胆人休艺术网| 精品深夜AV无码一区二区| 精品无码国产自产拍在线观看蜜桃 | 日本无码色情三级播放| 亚洲日韩精品一区二区三区无码| 久久精品一区二区三区| 欧美成人一区二区三区在线视频 | 欧美性猛交XXXX免费看| 欧美精品18VIDEOS性欧美| 成年免费A级毛片| 天码AV无码一区二区三区四区| 美女动态高潮激烈xxoo270 | 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 把老熟妇日出白浆| 岳把我用嘴含进满足我视频| 少妇伦子伦精品无码| 国产交乣女BBWBABES中国| 无码人妻少妇伦在线电影| 夜鲁鲁鲁夜夜综合视频欧美| 国产亚洲人成网站在线观看| 顶级欧美色妇XXXXX| 94久久国产乱子伦精品免费|